黄芪碱溶多糖的提取-博迅水浴锅使用

黄芪(Astragalus membranaceus)，又名绵芪，为豆 科（Leguminosae）黄芪属（Astragalus）多年生草本植物，主要产于内蒙古、甘肃、黑龙江和山西等地。黄 芪多糖是黄芪药用部分的主要活性物质之一，可作 为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗衰老、抗氧化、 抗炎、抗肿瘤及提高免疫力等多重功效。

1 材料和方法 

1.1 试验材料 

黄芪购于黑龙江省大庆市让胡路区普济康复医 院药房。 黄芪烘干→粉碎→过 80 目筛（直径 0.180 mm）→粉末→真空干燥器备用。 

1.2 主要试剂 

无水乙醇、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、碳酸钠、浓氨水、过 氧化氢、丙酮、溴化钾、硫酸亚铁、氢氧化钾、水杨酸、三（羟 甲基）氨基甲烷、邻苯三酚，所有试剂均为市售分析纯。 

1.3 试验仪器 

试验所需仪器如表 1 所示。

1.4 试验方法 

1.4.1 碱溶多糖提取流程 

黄芪粉末→优化 1%氢 氧化钾溶液提取的条件（提取温度、提取时间、料液 比）→离心 （3 600 r·min-1 ，15 min）→合并上清液→ 100 ℃水浴浓缩至原体积 1/3→硫酸中和→透析→ 水浴浓缩→3 倍体积 95%乙醇醇沉过夜→无水乙 醇、丙酮离心洗涤（3 600 r·min-1 ，15 min）→干燥器 干燥→碱溶粗多糖→冷冻保存。 

1.4.2 碱溶多糖红外光谱检测 

分析天平称取黄芪 碱溶多糖 2.0 mg，加入溴化钾压片后经傅立叶变换 红外光谱仪在 4 000~500 cm-1 波数范围内扫描。 

1.4.3 碱溶多糖含量测定方法 

采用苯酚硫酸法， 用分光光度计在 490 nm 波长处测定其吸光度，用回归 方程计算出碱溶多糖含量，并计算其碱溶多糖得率。 （1）葡萄糖标准曲线的绘制。精确称量干燥至恒 质量的无水葡萄糖于容量瓶中，定容。分别量取葡萄 糖标准溶液，制成一定浓度梯度于干燥试管中，补加 蒸馏水至相同体积，蒸馏水为空白，分别加 6%苯酚 0.5 mL，浓 H2SO4 2.5 mL，立即摇匀，室温静置 10 min 后于 490 nm 测定光吸收值，每个浓度平行做 3 次， 绘制葡萄糖浓度与吸收值之间的标准曲线。 （2）多糖含量测定。以碱溶多糖取代葡萄糖标准 溶液进行（1）试验，测定 490 nm 吸光度，根据标准曲 线计算多糖含量，进一步获得多糖得率，其计算公式 为：多糖得率(%)=多糖含量/原料质量×100 1.4.4 碱溶多糖提取工艺条件优化（1）碱溶多 糖提取单因素试验。以 1%氢氧化钾为溶剂，在其他条件相同的情况下，分别研究提取温度、提取时间、 料液比 3 个因素对黄芪多糖提取率的影响。各因素 梯度设置详见表 2。

（2）多糖提取的正交试验。在上述单因素试验的 基础上，按 L934 设计正交表进行三因素三水平的正 交试验，得出最佳提取条件。

2 结果与分析

在 3 438.24 cm-1 和 3 425.00 cm-1 处有缔合的-OH 伸缩振动吸收峰，具有典型的-OH 吸收峰；在 1 900 cm-1 ~1 600 cm-1 ，具有羰基吸收 峰，证明是多糖。在提取温度为 60 ℃、料液比为 1∶15 的条件下，研究提取时间对黄芪碱溶多糖提取率的 影响。在 50～130 min，多糖的提取率随 提取时间的增加呈先升后降趋势，碱溶多糖提取率 在 110 min 达到峰值，为 6.9%，与其他提取时间处理 差异显著（P＜0.05）。因此，提取时间选择 110 min 较 为适宜。在 50～90 ℃，随温度的升高， 提取率呈先升后降的趋势，在 60 ℃达到峰值，提取 率为 7.7%，与其他温度处理差异显著（P＜0.05）。因 此，黄芪碱溶多糖的提取温度选择 60 ℃较为适宜。

3 结论与讨论

采用不同的提取方法提取黄芪多糖，结果表明：提取方法 不同黄芪多糖提取率不同，但提取率均未超过 10%。梁子敬等、李海欧等分别采用超声辅助提 取法和水回流提取法提取黄芪多糖，结果表明：黄芪 多糖提取率分别为 6.18%和 6.4%，两者的提取率均 不高，但这两种方法在提取过程中对黄芪有效成分 破坏程度小。李金芳采用水煎煮法确定的最佳提 取工艺为：提取时间 45 min、提取温度 100 ℃、料液 比 1∶10、提取次数 3 次, 多糖提取率为 10.35%。刘永 录等采用 NaOH 水溶液提取法：取黄芪药材 400 g， 分别加 12 和 10 倍量 pH 值为 12 的 NaOH 水溶液 煎煮 2 次，经后续处理，黄芪多糖提取率为 7.73%。 本试验采用碱提法通过单因素试验和正交试验对黄 芪碱溶多糖的提取工艺进行优化，在提取温度 70 ℃、 提取时间 130 min、料液比 1∶20，碱溶多糖提取率达 （15.63±0.36）%，上海博迅医疗提高了黄芪的利用率及黄芪多糖的 提取率。

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