牦牛传染性鼻气管炎流行病学调查分析-培养箱使

牛传染性鼻气管炎( IBＲ) ，又称坏死性鼻炎、红 鼻病，是由牛传染性鼻气管炎病毒( IBＲV) 引起牛 的一种急性、热性、接触性传染病，是 OIE 规定的 B 类动物疫病，我国农业农村部( 原农业部) 将其定 为二类动物疫病。

1 材料与方法

1. 1 血清样品

从西藏拉萨市、林芝市、日喀则市、昌都市、山南 市、那曲市和阿里地区等七个地区共采集未接种 IBＲ 疫苗的牦牛血清 300 份，其中拉萨市 30 份，其余 6 个 地区各 45 份。血清采回后－20 ℃ 保存，检测前置于 室温下自然解冻。

1. 2 主要仪器与试剂

酶标分析仪( 型号为 Ｒayto ＲT－6100) ，购自深圳 雷杜生命科学股份有限公司; 微量移液器( 型号为 dragon－lab) ，购自赛伯乐( 上海) 仪器有限公司; 优普 超纯水制造系统，购自成都超纯科技有限公司; 恒温恒湿培养箱，购自上海博讯实业有限公司医疗设备厂; 冰箱，购自中科美菱低温科技股份有限公司。 IBＲ 抗体酶联免疫分析试剂盒、牛传染性鼻气管 炎抗原酶联免疫分析试剂盒，均购自江苏酶免实业有限公司。

1. 3 IBＲ 血清抗体、抗原的检测

IBＲ 血 清 抗 体、抗原检测严格按照酶联免疫 ( ELISA) 分析试剂盒说明书方法操作。 结果判定: 阳性对照孔 OD450平均值≥1. 00，阴性 对照孔 OD450平均值≤0. 10 时，判定试验成立; 阴性 对照孔平均值+0. 15 为临界值; 样品 OD450值＜临界值 时，判定 为 阴 性; 样 品 OD450 值 ≥ 临界值时判定为 阳性。

1. 4 数据的统计分析

采用 SPSS 19. 0 软件对西藏各地区牦牛 IBＲ 血 清抗体阳性率进行显著性分析，P＞0. 05 差异不显著， P＜0. 05 差异显著。

2 结果与分析

西藏七个地区牦牛血清样品中 IBＲ 抗体、抗原 检测结果见表 1。

从表 1 可见: 血清抗体平均阳性率为 11. 00% ( 33 /300) ，其中日喀则市和林芝市牦牛 IBＲ 血清抗 体阳性率最高，均为 17. 78%( 8 /45) ; 山南市最低，为 0( 0 /45) ; 血清抗原平均阳性率为 10. 00%( 30 /300) ， 其中日喀则市牦牛 IBＲ 血清抗原阳性率最高，为 20. 00%( 9 /45) ; 山南市最低，为 2. 22% ( 1 /45) 。对 七个地区牦牛血清样品 IBＲ 抗体、抗原阳性率进行 显著性分析，结果表明，日喀则市和林芝市牦牛 IBＲ 血清抗体阳性率与昌都市、山南市差异显著 ( P ＜ 0. 05) ; 拉萨市牦牛 IBＲ 血清抗体阳性率与山南市差 异显著( P＜0. 05) 。日喀则市牦牛 IBＲ 血清抗原阳性 率与阿里地区、昌都市和山南市差异显著( P＜0. 05) ， 拉萨市牦牛 IBＲ 血清抗原阳性率与山南市差异显著 ( P＜0. 05) 。

3 讨论

自 1980 年周泰冲等首次从新西兰进口至我 国的奶牛中分离到 IBＲV 以来，我国各地均出现了 IBＲ 流行的报道，且部分地区流行情况较为严重， 而与西藏相邻的新疆、青海、四川等省区 IBＲ 流行情 况也 令 人 堪 忧。胡 文 兵 等、李静 等、刘洁 琼 等分别于 2010 年、2012 年和 2016 年对新疆不同地区牛群的 IBＲ 感染情况进行调查，结果表明，抗体 阳性率分别为 36. 9%、82. 5%、80. 7%; 贺晓龙等、 沈艳丽等、韩照清等分别于 2009 年、2010 年和 2012 年对青海不同地区进行 IBＲ 流行情况调查，结 果表明，血清抗体阳性率分别为 47. 62%、19. 8% 和 44. 6%; 韩照清等、何美琳等于 2012 年、邓宇 等于 2015 年在四川部分地区开展 IBＲ 流行情况 调查，结 果 表 明，血清抗体阳性率分别为 27. 9%、 77. 4%、35. 29%; 韩照清等2014 年在我国西部高 原地区的调查结果表明，西藏部分地区 IBＲ 血清阳 性率为 38. 6%、青海部分地区为 44. 6%、四川部分地 区为 27. 9%; 曲萍等对包括四川、青海、新疆等在 内的 11 个半农半牧区的 IBＲ 血清学调查结果表明， 2014—2016 年的血清阳性率分别为 51. 46%、 57. 16%和 50. 16%; 同时有资料显示，与西藏相邻的 印度阿鲁纳恰尔邦牦牛 IBＲ 血清抗体阳性率也高达 41%，而本次牦牛 IBＲ 血清抗体检测结果明显低 于西藏周边各省份及地区。