膜性肾病大鼠肾脏保护作用分析-水浴锅的应用！

膜性肾病（Membranous nephropathy，MN）是临床 上较为常见的一种肾小球疾病，是成人肾病综合症 常见病理类型之一。其病理特征主要为肾小球毛细 血管基底膜弥漫性增厚，且伴随着上皮细胞下免疫 复合物沉积。该病迁延难愈，有超过 40%患者进一 步发展为慢性肾衰竭。目前针对 MN 治疗尚无特效 药物，临床常使用激素、细胞毒性药物、免疫抑制 剂等药物进行治疗，但这些药物总体疗效不佳，且 往往伴随着一系列不良反应。因此，亟需探寻安 全有效的治疗 MN 的药物。近年研究发现，中医药在 治疗 MN 方面有着独特优势，可与西药进行联合规范 化治疗，有助于控制 MN 的病情进展，降低药物不良 反应的发生。

1 材料与方法

1.1 动物

SD 大鼠 45 只，雄性，SPF 级，体质量（200±20）g，广州中医药大学实验动物中心提供，动 物许可证号：SCXK（粤）2013-0034。

1.2 药物及试剂

白芍总苷，宁波立华制药有限公 司，批号：20140712；醋酸泼尼松片，广东华南药 业集团有限公司，批号：140502；白蛋白（ALB）测定 试剂盒（批号：20160518）、总蛋白（TP）测定试剂盒 （批号：20160523）、总胆固醇（TC）测定试剂盒（批 号：20160412）、甘油三酯（TG）测定试剂盒（批号： 20160513）、 丙 二 醛（MDA）测 定 试 剂 盒（批 号 ： 20160416）、总超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒（批 号：20160507），均为南京建成生物工程研究所产 品；Beclin1 抗体（批号：3738s）、PI3K 抗体（批号： 4257S）、p-Akt 抗体（批号：4060P）、mTOR 抗体（批 号：2983S）、Desmin 抗体（批号：5332D）、β-actin 抗体（批号：D0615），均为美国 CST 公司产品；LC3 抗 体，英国 Abcam 公司，批号：ab192890；Synaptopodin 抗体，美国 Santa Cruz 公司，批号：sc-515842。

1.3 仪器

THM51119300 全波长酶标分析仪，美国 Thermo Fisher Scientific 公司；T15RT 台式高速冷冻 离心机，上海天美生化仪器设备工程有限公司； HH.S11-6 电热恒温水浴锅，上海博讯提供；天能凝 胶成像系统，上海天能化学发光工作站；TE2000-S 荧光倒置显微镜，日本 NIKON 公司。

1.4 分组、模型复制及给药方法

大鼠适应性喂养 1 周后，随机分出 8 只作为正常对照组，其余大鼠按 以下方法进行模型复制：取制备好的 C-BSA（参照 Border 法制备）1 mg 加入 0.5 mL 弗氏不完全佐剂制备成乳剂，于大鼠皮下进行多点注射预免疫。1 周 后，大鼠隔天尾静脉注射 2.5 mg C-BSA，连续 3 周。模型复制结束后，用考马斯亮蓝法测定各大鼠 24 h 尿蛋白含量，与正常对照组比较，剔除模型复 制组中尿蛋白为阴性的大鼠，然后随机分为模型 组，TGP 高、低剂量（200、100 mg·kg-1）组，醋酸泼 尼松（5 mg·kg-1）组，每组 8 只。采取直接灌胃法给 药，每日 1 次，连续 4 周。空白对照组和模型组给 予等体积生理盐水灌胃。

2 结果

见表 1。与正常对照组比较，模型 组大鼠血清中 TP、ALB 含量显著降低（P < 0.01）， TC、TG 含量显著升高（P < 0.01）；与模型组比较， TGP 高、低剂量组和醋酸泼尼松组大鼠血清中 TP、 ALB 含量显著升高（P < 0.05，P < 0.01），TC、TG 含 量显著降低（P < 0.01）。

与正常对照组比较，模型组大鼠血 清中 MDA 含量显著升高（P < 0.01），SOD 含量显著 降低（P < 0.01）；与模型组比较，TGP 高、低剂量组 和醋酸泼尼松组大鼠血清中 MDA 含量显著降低（P < 0.01），SOD 含量显著升高（P < 0.05，P < 0.01）。

3 讨论

TGP 是从传统中药毛茛科植物白芍中提取的一组 糖苷类物质，是白芍的主要有效成分 。近年来已被 广泛应用于治疗各种免疫性疾病 。研究表明，该药 单用或者联合使用治疗各种类型肾脏疾病，如糖尿 病肾病、狼疮性肾炎及肾病综合症等均显示出良好 治疗效果，能够有效地缓解肾病临床症状及调节异 常血液生化指标。与传统治疗药物比较还具有 不良反应小，无肝功能损伤的优势。因此，深入探 讨 TGP 治疗慢性肾病的作用及相关作用机制具有重 要的临床价值。