兽医实验室高压灭菌技术探讨

高压蒸汽灭菌技术广泛应用于各类实验室，特别是兽医实验室，操作微生物较多，高压灭菌器几乎成了必备设备。基于高温水蒸气具有较强的穿透作用，可以有效的杀灭各种微生物和芽孢，高压灭菌器可以用于各种微生物的消毒灭菌，不仅可以用于实验室污染废弃物的消毒，也可以用于实验室器械、培养基等清洁物的灭菌。

1 高压灭菌器规范

根据《中华人民共和国特种设备安全法》等相关法律要求，高压灭菌器属于特种设备安全管理范畴，采购前要查验生产厂家的产品质量证明书，其中应包含产品安全性能监督检验书、产品合格证和厂家特种设备制造许可证，安装时要到当地市场监督管理部门（质量监督部门）进行告知备案，取得特种设备使用登记证后方可使用。高压灭菌器每 3 年要请有资质的特种设备检验单位进行一次检验，配件压力表每半年检定一次，安全阀每年校验一次。相关人员持证上岗，使用单位必须有一名人员取得特种设备安全管理证，操作人员必须取得特种设备压力容器操作证。

2 高压灭菌器使用

注意安全是第一位的，小心蒸汽烫伤，有的操作者灭菌结束时为了加快排气，将安全阀提起，这种做法是不允许的，高温蒸汽容易伤害到人员，另外安全阀一经弹开，弹簧结构发生变化，需要重新校验。灭菌结束后，打开盖子时，虽然相对压力已经降到零，但是水和蒸气仍然可以达到 100°C左右，操作者应该带上手套等护具，做好人员防护。要做好用电安全，高压灭菌器一般电功率较大，多台灭菌器同时使用要计算好功率，配备适合电缆，不能超载使用，电源必须有效接地，定期测试断路器，检查电源线是否被水蒸气腐蚀等。使用高压灭菌器要做到污染物、清洁物分开，实验室不能使用同一个灭菌器进行污物与清洁物的灭菌。必须按照说明书加入合适量的水，应当使用软化水或蒸馏水防止结垢，灭菌物品容积不超过灭菌器的 3/4，特别注意不能有物品阻挡排气孔。洁净物高压灭菌时，要注意防止湿包现象的产生，湿包即是灭菌后出现了器械等包装被湿润的情况，细菌等病原微生物可以通过湿润的部分污染到洁净物品上，导致灭菌失败，引起实验污染或手术感染。解决湿包的方法是，合理规范的进行包装，提高蒸汽的质量，减少含水量，使用真空脉动灭菌器。

3 真空高压灭菌器

有的实验室使用的是大型脉动双扉高压蒸汽灭菌器，扉即是门，双扉保障了灭菌物品的路径，是从一侧的门进入，从另一侧的门取出，达到生物安全效果，脉动是指灭菌器有几次抽真空的动作，除去冷气团，达到更好的灭菌效果。抽真空方式不能用于培养等液体的灭菌。生物安全等级较高的实验室应考虑采用带有冷凝水收集的高压灭菌器，此类灭菌器可以对冷凝水进行收集和灭菌，保障生物安全。

4 高压灭菌消毒效果验证

国标《实验室生物安全通用要求》中规定，实验室要对消毒灭菌效果进行监测，另外消毒效果验证也是保证实验结果的重要措施。高压灭菌器日常使用时，需要放置灭菌指示卡或指示胶带，灭菌结束后指示卡或胶带变为指定的颜色，即表示灭菌合格。B- D 测试广泛用于抽真空灭菌器性能的测试（B 和 D 是两位发明者的姓氏字母），有商品化的检测包，将B- D 测试包单独放置于灭菌器的中央，使用 134°C，3.5min抽真空条件灭菌（具体参照说明书），灭菌后指示卡呈现规定交叉图案，说明真空灭菌效果合格。另外可以使用微生物培养的方法进行灭菌器效果验证，将菌片（枯草芽孢杆菌等）用多层纱布包裹，灭菌后将菌片投入特定培养基后观察，培养基指示剂变色说明仍然有细菌生长，灭菌失败，培养基澄清
未变色，说明没有细菌生长，灭菌效果合格。