银杏叶为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的 干燥叶,含有多种成分,如黄酮类、内酯类、多 糖类、酚类等,具有免疫调节、抗衰老、抗氧 化、抗炎、抗肿瘤、降血脂等生物活性。近年 来关于银杏叶多糖的抗氧化活性研究表明,其对 DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子等具有较强 清除作用,又基于多糖类物质具有较好的吸 湿、保湿及营养肌肤等作用研究 ,提示银杏叶多 糖在现代保健、护肤等产品开发方面具有一定的 潜在价值。
1 材料
1. 1 仪器
UV-1700双光束紫外分光光度计[岛津 企业管理(中国)有限公司];YB-P6智能透皮试验 仪(天津药典标准仪器厂);DL-720E超声仪(上海 之信仪器有限公司);SC-3610低速离心机(科大创 新股份有限公司中佳分公司);S30-UV 实验室纯 水系统(上海和泰仪器有限公司);CP-225D 电子 天平(0.01 mg)(德国赛多利斯公司);ME-204电子 天平(0.000 1 g)(瑞士梅特勒—托利多公司); 博迅DZF-6050 真空干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)。
1. 2 试药
银杏叶(批号:鲁 1702001),由江西 樟树天齐堂中药饮片有限公司提供,经北京大学 深圳医院袁劲松主任中药师鉴定,所用药材符合 《中华人民共和国药典》2015版要求。D-无水葡萄 糖对照品(中国食品药品检定研究院,批号: 110833-201506)。其余试剂均为市售分析纯。
1. 3 动物
SPF级健康SD大鼠,体质量(200±10)g, 由广东省医学实验动物中心提供,动物质量合格 证号:SYXK(粤)2017-0125。
2 方法与结果
2. 1 银杏叶多糖的制备
称取银杏叶干品100 g,先用石油醚提取至提取液无色,药渣风干后加入 水加热回流提取3次,1.5 h/次,过滤,滤液浓缩至 适量,加入氯仿和正丁醇溶液混合液(V∶V = 5∶1), 振荡,反复多次除去变性蛋白质。在已脱蛋白溶 液中加入体积分数 95%乙醇调至终浓度为 80%, 4 ℃静置24 h,抽滤,沉淀物依次用体积分数95% 乙醇、无水乙醇洗涤 2 ~ 3 次,真空干燥至恒质 量,得到粗多糖 8.36 g。再将粗多糖通过纤维素 柱,蒸馏水洗脱,Molish 反应检测至洗脱液呈阴 性。合并洗脱液,浓缩至适量,用乙醇沉淀,4 ℃ 静置24 h,抽滤,沉淀物依次用无水乙醇洗、丙酮 洗涤2 ~ 3次,真空干燥,得到多糖4.28 g(多糖含 量为2.94 g)。
2. 2 吸湿性能研究
于室温(25 ± 1)℃,将饱 和醋酸钾溶液、饱和碳酸钾溶液和饱和硫酸铵溶 液分别放入干燥器内,控制相对湿度(RH)为 43%、60%、81%。准确称取3份银杏叶多糖、丙 三醇、海藻酸钠,1.0 g/份,加入到直径3 cm的称 量瓶中,再分别放置于以上干燥器内,于 1、2、 4、8、12、16、24 h等不同时间点,测定样品放置 前、后的质量(m0、mn),计算吸湿率: 吸湿率 (%)= 100(mn - m0)/ m0。同时,以吸湿率为纵坐 标、时间为横坐标,绘制变化曲线,计算其趋势 线斜率k,即为样品的吸湿速率。 RH43%的环境中,各样品在0 ~ 24 h内的吸湿 率高低依次为丙三醇>海藻酸钠>银杏叶多糖, 在24 h的吸湿率分别为81.2%、32.8%、27.5%。其 中,丙三醇的吸湿率上升速度最快(k = 9.434),而 海藻酸钠(k = 3.088)与银杏叶多糖(k = 2.634)则是 缓慢上升,且较为接近。吸湿率变化见图1,趋势 线见表1。
RH60%的环境中,各样品在0 ~ 24 h内的吸湿 率高低依次为丙三醇>海藻酸钠 ≈ 银杏叶多糖, 在24 h的吸湿率分别为93.2%、35.7%、36.9%。其 中 , 丙 三 醇 的 吸 湿 率 上 升 速 度 依 然 最 快(k = 10.570),而海藻酸钠(k = 3.292)与银杏叶多糖 (k = 2.788)则 是 缓 慢 上 升 , 且 较 为 接 近 。 与 RH42%环境相比,各样品吸湿率均有所增加。
3 讨论
我国的银杏叶产量占据世界的 90%以上,资 源十分丰富,且银杏的叶、果和外种皮等部位均 含有多糖。本研究立足于银杏叶多糖的保湿吸 湿、透皮吸收性能的评价,可为其在美容护肤方 面的应用提供依据,不仅可以更为显著地提高银杏 叶的资源利用率,而且还能创造更高的经济价值, 更大地调动种植户的积极性,具有重要的意义。
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