博迅振荡培养箱对烟草赤星病菌的拮抗研究应用

    烤烟一旦患上赤星病，叶片上就会出现 很多病斑，影响烤烟进行正常的光合作用，阻碍烤烟的健康 生长。随着化学农药残留和环境污染问题的日趋严重，在 烟草病害防治过程中应减少化学农药的使用。芽孢杆菌是 一类产芽孢、革兰氏染色呈阳性的细菌类群，具有较好的生 物防治烟草病害的潜力，已成为研发生物防治菌剂的理想对 象。仪器: 立式压力蒸汽灭菌锅 LDZX－50KBS，上海申安医疗器械厂; 单人垂直送风超净工作 台，苏净集团安泰公司; 振荡培养箱 BSD-250型，上海博 迅实业有限公司医疗设备厂; 小宝多功能粉碎机 XY－600B， 永康市小宝电器有限公司; 101 型电热鼓风干燥箱，北京科伟 永兴仪器有限公司; 调速多用振荡器 HY－4，国华电器有限公 司; OLYMPUS CX31 光学显微镜等。 工具: 玻璃锥形瓶、培养皿、涂布棒、小量筒、试管、打孔 器、接种环、离心管、移液枪等。 LB 固体培养基: 酵母 5 g、蛋白胨 10 g、NaCl 10 g、琼脂 15～20 g、无菌水 1 000 mL。PDA 固体培养基: 马铃薯 200 g、 葡萄糖 20 g、琼脂 15～20 g、无菌水 1 000 mL。

    平板对峙试验的初始 菌物数量条件，以完全长满 PDA 培养皿的烟草赤星病菌为 原始病菌条件，以一打孔器口径( 直径 6 mm) 为平板对峙试 验中烟草赤星病菌的接入量。操作流程: 用接种环从 JW－5－ AN 菌株试管中挑取芽孢杆菌，以肉眼可见接种环上载有芽 孢杆菌为第一节点; 将载有芽孢杆菌的接种环置于盛有 100 μL 无菌水的离心管中搅拌，以肉眼可见接种环上的芽 孢杆菌全部进入离心管内 100 μL 无菌水为第二节点; 摇匀 离心管，制成 JW－5－AN 芽孢杆菌菌悬液; 再用移液枪吸取 2 μL 菌悬液作为平板对峙试验菌株 JW－5－AN 的接入量。经过观察及测量，贝莱斯 芽孢杆菌 JW－5－AN 与烟草赤星病菌的平板对峙 5 d 样本数 据: 烟草赤星病菌 5 d 最大长度 56．9 mm，烟草赤星病菌 5 d 最小宽度 29．1 mm，贝莱斯芽孢杆菌 JW－5－AN 对烟草赤星 病菌的 5 d 抑制直径为烟草赤星病菌 5 d 最大长度减去烟草 赤星病菌 5 d 最小宽度，为 27．8 mm。