高密度发酵培养基研制

材料与方法

YXQ- LS- 50SⅡ型立式高压蒸汽灭菌锅，上海 博迅实业有限公司医疗设备厂；SW- CJ- 1F 型超净 工作台，苏州安泰空气技术有限公司；AG050 型， 厌 氧 培 养 罐 ： 广 州 雷 得 生 物 技 术 有 限 公 司 ； SE6001FZH，电子天平美国奥豪斯公司；MEI04E 型，分析天平梅特勒托利多公司；PHS- 3C 型，pH 计上海仪电科学仪器股份有限公司；LRH- 250 型， 生化培养箱上海一恒科学仪器有限公司；MX- S 型， 旋涡振荡器美国赛洛捷克公司。改良 MRS 液体培养基：葡萄糖 2%、蛋白胨 1% 、 酵 母 膏 0.5% 、 牛 肉 膏 1% 、 磷 酸 氢 二 钾 0.12%、柠檬酸铵 0.26%、硫酸镁 0.058%、硫酸锰 0.005%、吐温 80 0.15%、L- 半氨酸盐酸盐 0.1%。

结果与分析

单因素试验结果表明，分别按 2% （乳糖和葡 萄糖各 1%） 添加不同碳源、按 1% （蛋白胨和胰蛋 白胨各 0.5%） 添加不同氮源、按 3% （麦芽浓缩汁 和玉米浆各 1.5%） 添加不同生长因子的增菌效果不 同。其中乳糖作为碳源增菌效果最好，培养 12 h 活 菌数为 1.9×109 CFU/mL；胰蛋白胨为增菌效果最 好的氮源，培养 12 h 活菌数为 1.53×109 CFU/mL； 玉米浆为增菌效果最好的生长因子，培养 12 h 活 菌数为 1.84×109 CFU /mL。因此选择乳糖、胰蛋白 胨和玉米浆为增菌培养基的碳源、氮源和生长因 子，20 g/mL 乳糖、10 g/mL 胰蛋白胨和 30 g/mL 麦 芽汁为响应面试验的因素低水平取值。由 方 差 分 析 表 可 知 ， 模 型 有 统 计 学 意 义 （F=26.64，P<0.05），调整 R2 为 0.936 9，说明菌数 的变化 93.69%是由所选因素引起的。本模型中信噪 比值为 16.053，说明了模型的充分性和合理性。

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