雪胆(Hemsleya sinesis Cogn)为葫芦科雪胆属 植物,其有效部分为块根。其提取物具有抗肿瘤、广 谱抗菌、抗病毒、抗炎镇咳、抗肝炎等作用。 为验证雪胆口服液对鸡大肠杆菌的防治效果作 用,根 据中华人民共和国农业部公告——兽 用 中 药 、天 然药物临床试验技术指导原则(第 1596 号)中临 床扩大试验要求,对雪胆口服液的临床疗效验证, 选择某养殖场饲养的海兰白壳蛋鸡大肠杆菌病自 然病例作为研究对象, 应用雪胆口服液按 4mL/L 饮水添加,连续饮用 5d,观察防治效果。
1 材料与方法
1.1 试验动物
海兰白壳蛋鸡 1400 只,按常规免 疫 程 序 免 疫 疫 苗,养 至 42 日 龄 时,鸡 只 表 现 精 神 萎 靡,羽 毛 逆 立,扎 堆,食 欲 废 绝,腹 泻,粪 便 呈 黄 绿色水便,初步怀疑大肠杆菌病。
1.2 病例诊断和分组
对 上 述 鸡 群,选 择 症 状 典 型病例,进行剖检和细菌分离、生化鉴定。 将 1400 只随机分为中药组及对照组两组,每 组约 700 只,两组给予同样的饲养管理条件。 Ⅰ组 为中药组, 给予浓度为推荐剂量的雪胆口服液自由饮水, 连续给药 5d; Ⅱ组为硫酸新霉素可溶性 粉 组 , 按 推 荐 剂 量 (0.5g/L) 饮 水 给 药 , 连 续 给 药 5d,每天观察并记录鸡只的精神状况。 分组及给药 情况见表 1。
1.3 试验药物与化学试剂
雪 胆 口 服 液,德 州 神 牛药业有限公司中试生 产,批 号:20160412。 硫 酸 新霉素可溶性粉,购于河南森隆兽药有限公司,批 号:20160826;麦 康 凯 琼 脂、营 养 琼 脂、细 菌 微 量 生 化反应管,购于杭州天和微生物试剂有限公司;营 养肉汤,购于北京双旋微生物培养基制品厂。
1.4 试验仪器
电热鼓风干燥箱,北 京 市 永 光 明 医 疗 仪 器 厂 ;生化培养箱(博迅SPX-250B-Z),上 海 博 迅实业有限公司医疗设 备 厂 ; 恒温培养振荡器 (ZHWY-103D), 上海智城分析仪器 制造有限公 司;电子天平(MR200A),上海第二天平仪器厂;超 净工作台(LGJ-10),北京四环科学仪器厂。 TGL16 高速台式电动离心机, 金坛市杰瑞尔电器有限公司。
1.5 检测指标
每天观察记录试验鸡的临床症 状变化、死亡、增 重情况,计算各组的保护率、治愈 率、死亡率(统计方法同试验性临床试验)。
1.6 数据分析
对采用 SPSS 17 软件对试验数据 进行显著性检验,死 亡 率、保 护 率、治 愈 率 采 用 卡 方 x2 检验。 两组的 X2 检验: X2 = (ad-bc)2 n/(a+ b) (c+d) (a+c) (b+d),其 中 I 组 存 活 数 a,死 亡 数 c;II 组存活数 b,死亡数 d。 n 为两组动物总数。 X2 >6.63 为差异显著,X2 <3.84 表示差异不显著。
2 结果与分析
2.1 病例诊断
2.1.1 剖检变化
对典型病例进行剖 检, 可 见 到 大肠杆菌病的病理变化:肌 肉 脱 水,颜 色 暗 红;肝 脏肿胀, 有散在 的出血点, 部分鸡有轻微的心包 炎、肝周炎表现。
2.1.2 细菌分离、 鉴定
从病死鸡的肝 脏 采 集 病 料,接种于麦康凯琼脂培养基,培 养 24h 后,可 见 红色菌落。 挑取单个菌落,接种肉汤增菌后,进行 生化试验, 生化鉴定结果符合大肠杆菌的生物学 特征。
2.2 防治效果
观察两种药物对大肠杆菌病鸡的防治效果 , 新霉素组用药第 2 天后症状明显好转,腹泻停止, 饮食欲有所恢复, 第 3 天以后没有再出现死亡 现 象,中药组在用药后症状稍见好转,部分鸡 精神萎靡,死亡现象一直持续到第 4 天,死亡 数 为 93 只。 统计两组药物饮水给药后的 1 周 内 的 治 愈 率、保 护率、死亡率各项指标,经统计学分析均为差异显 著(P<0.05)。 说明雪胆口服液对鸡大肠杆菌病的 防治效果不及新霉素。
3 结论
雪胆口服液对鸡大肠杆菌自然病例的治疗保 护率为 86.71%,但效果不及新霉素(95.57%)。
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