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恒温水浴锅在火龙果中的作用

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-07-12 15:26【
火龙果,属仙人掌科量天尺属和蛇鞭柱属植物,北方地区主要采用日光温室进行种植。本研究上海博讯医疗生物仪器股份有限公司以成熟期红肉火龙果为试材,通过改良CTAB法进行总DNA提取,旨在探求红肉火龙果果肉、果皮及种子中DNA的含量情况,为进一步从分子遗传学角度进行红肉火龙果各类型遗传背景研究提供依据。
 
仪器
高速离心机(德国EPPendorf)、移液枪(德国EPPendorf)、紫外分光光度计 (德国EPPendorfBiophotometer)、凝胶成像系统(北京六一)、恒温水浴锅(上海博讯)、电泳仪(北京六一)、电泳槽(北京六一)等。
上海博迅HH.S21-6电热恒温水浴锅
1 红肉火龙果果实不同部位DNA质量浓度不同
通过改良
CTAB法对红肉火龙果果肉、果皮、种子部位进行DNA提取,结果表明成熟期红肉火龙果果肉、果皮、种子均可有效提取DNA,但提取的DNA质量浓度略有差异,如从种子中提取的DNA质量浓度0.135μg·ml-1,果皮中提取DNA质量浓度0.078μg·ml-1,果肉中提取的DNA质量浓度0.036μg·ml-1,种 子 中DNA量浓度大约是果皮中DNA质量浓度的1.73倍,果肉中DNA质量浓度的3.75倍;果皮中DNA质量浓度是果肉中DNA质量浓度的2.17倍。

2 改良CTAB法去除杂质效果好
成熟期红肉火龙果果实中含有较多的糖类、蛋白质、酚类等次生物质,严重影响DNA的提取质量和纯度。上海博讯试验结果表明:通过改良CTAB提取的红肉火龙果果肉、果皮、种子中的DNA度均超过0.030μg·ml-1,说明提取物中糖、蛋白质、多酚、酶等干扰物质去除较好,能够为进一步研究提供高质量的DNA

3 研磨及裂解时间非常关键
为了能够获得高质量的DNA,红肉火龙果果肉、果皮、种子在研磨时应加入充足的液氮,并迅速研磨,使果肉、果皮呈粉色粉末,种子成白色粉末,研磨好后迅速转移至离心管中,迅速加入CTAB缓冲液,充分摇匀,在65℃ 水浴中反应60min,进行裂解。裂解时间短,DNA释放不完全,时间长DNA降解严重,因此,破壁好坏及细胞裂解时间长短对于DNA的得率至关重要。
以上内容仅供参考。